一、日常维护
1.流动相管理
选择与配制:流动相应选用色谱纯有机溶剂,并在室温下密封避光保存。对于含有缓冲盐的流动相,应现配现用,低温下密封保存,一般不超过3天,并建议加入5%的有机溶剂以防止细菌生长。
过滤与脱气:流动相在使用前应通过0.45μm或更细的膜过滤,以去除微粒。同时,流动相需要脱气处理,以减少气泡对基线稳定性和色谱峰形的影响。脱气方法包括加热、抽真空、超声波、通惰性气体和在线脱气机等。
2.系统清洗
输液泵清洗:定期清洗输液泵的单向阀和柱塞杆,以防止盐类或有机溶剂残留导致的腐蚀和堵塞。对于使用过缓冲盐溶液的泵,可使用40℃~50℃的温水超声清洗;对于使用过纯乙腈的泵,可使用异丙醇超声清洗。
自动进样器清洗:每次批量进样后,应手动清洗进样针或进一针50μl的流动相进行冲洗。若流动相中含有盐,则应用纯净水替代缓冲盐部分比例进行冲洗。
3.检测器维护
氘灯检查:定期检查氘灯的使用情况,包括其寿命和发光强度。若发现灯故障,如基线噪声大、灵敏度低等,应及时更换。
流动池清洗:流动池内若有气泡或污染,会影响检测器的性能。应使用脱气甲醇或适宜的溶剂进行冲洗,以去除气泡和污染物。对于严重污染的流动池,可使用异丙醇、二氯甲烷或6mol/L的硝酸进行清洗。
二、操作注意事项
1.开机与自检
在开机前,应检查电源电压是否稳定,并确保所有连接线路正确无误。
仪器将进行大约5分钟的自检过程,待仪器自我测试完毕后,画面上方的状态显示区会出现“Idle”状态,表示开机测试正常。
2.进样操作
在进样前,应确保样品瓶清洁并符合Waters公司认可的标准。
使用微量进样瓶时,应设定正确的针尖高度值,以避免进样不准确。
每次进样后,应检查进样针是否干净,避免残留物影响下次进样。
3.梯度洗脱与压力控制
在进行梯度洗脱时,应确保流动相混合均匀,避免产生气泡和基线漂移。
定期检查泵的压力稳定性和密封性,以确保实验结果的准确性。
4.关机操作
在关机前,应取出所有样品瓶或将样品盘全部取出,以保持样品仓内和样品盘的清洁。
关闭仪器时,应按照仪器操作手册的指示进行,避免突然断电导致仪器损坏。
三、常见故障与排除
1.基线噪声大
检查氘灯是否老化或损坏,必要时更换新灯。
检查流动相是否脱气充分,必要时进行再次脱气处理。
检查检测池内是否有气泡或污染物,必要时进行清洗。
2.色谱峰形异常
检查色谱柱是否堵塞或污染,必要时进行清洗或更换。
检查流动相比例和流速设置是否正确,确保梯度洗脱过程平稳进行。
检查进样系统是否有泄漏或污染,必要时进行清洗和维护。
二手Waters液相的维护与操作涉及流动相管理、系统清洗、检测器维护等多个方面。通过定期维护和规范操作,可以确保仪器的稳定运行和延长其使用寿命。同时,在遇到常见故障时,应及时排查并采取相应的解决措施以确保实验结果的准确性。