安捷伦(Agilent)HP系列毛细管色谱柱是气相色谱(GC)分析中的核心耗材,其性能直接影响分离效果、分析速度和结果准确性。选择合适的色谱柱需综合考虑目标化合物性质、分析条件(如温度、载气类型)以及应用场景。以下是安捷伦HP系列色谱柱的选择指南,涵盖关键参数、常见型号及应用建议:
一、色谱柱选择的核心参数
固定相类型
非极性柱:如HP-1、HP-5(聚二甲基硅氧烷,PDMS),适用于分离非极性或弱极性化合物(如烷烃、芳香烃、多环芳烃)。
中等极性柱:如HP-35、HP-50(苯基甲基硅氧烷),适合分离含苯环或极性基团的化合物(如药物中间体、农药)。
强极性柱:如HP-FFAP(聚乙二醇改性)、HP-WAX(聚乙二醇),用于分离极性化合物(如醇类、羧酸、酯类、挥发性风味物质)。
特殊固定相:如HP-PLOT(多孔层开口管柱,用于永久性气体分析)、HP-MOLSIV(分子筛柱,用于分离小分子气体如CO₂、O₂)。
柱长与内径
柱长:通常15–60米,长柱(如60m)提高分离度但延长分析时间,短柱(如15m)适合快速分析。
内径:常用0.18–0.53mm,细内径(0.18–0.25mm)提高柱效但需更高进样压力,粗内径(0.32–0.53mm)适合高沸点或大体积样品。
膜厚
固定相涂层厚度(μm)影响载样量和分离效率:
薄膜(0.1–0.25μm):适合高沸点化合物或需快速分析的场景。
厚膜(0.5–5μm):提高低沸点化合物保留,适合痕量分析或复杂样品。
最高使用温度
需确保分析温度低于色谱柱最高耐受温度(如HP-5最高325℃,HP-WAX最高250℃),避免固定相流失导致柱效下降。
二、安捷伦HP系列常见型号及适用场景
1.非极性柱
HP-1(100%PDMS)
特点:高惰性、低流失,适合高温分析。
应用:石油烃类分析(如C₅–C₄₀烷烃)、多环芳烃(PAHs)、药物杂质筛查。
典型规格:30m×0.32mm×0.25μm。
HP-5(5%苯基-95%甲基聚硅氧烷)
特点:通用型非极性柱,平衡分离能力与耐温性。
应用:农药残留、香精香料、环境污染物(如VOCs)、法医毒物分析。
典型规格:30m×0.25mm×0.25μm。
2.中等极性柱
HP-35(35%苯基-65%甲基聚硅氧烷)
特点:中等极性,适合分离含苯环或双键的化合物。
应用:药物代谢产物、塑料添加剂、油脂氧化产物分析。
典型规格:30m×0.32mm×0.5μm。
HP-50+(50%苯基-50%甲基聚硅氧烷)
特点:极性略高于HP-35,改善对极性化合物的保留。
应用:香料成分、天然产物提取物、环境有机污染物。
典型规格:60m×0.25mm×0.25μm。
3.强极性柱
HP-FFAP(聚乙二醇改性)
特点:对羧酸、醇类等极性化合物有强保留,且耐水解。
应用:食品风味分析(如乳制品中的游离脂肪酸)、血液酒精检测、水质分析。
典型规格:30m×0.32mm×0.25μm。
HP-WAX(聚乙二醇)
特点:极性最强,适合分离高极性挥发性物质。
应用:香精香料、烟草挥发物、植物精油成分分析。
典型规格:30m×0.25mm×0.5μm。
4.特殊用途柱
HP-PLOTQ(多孔层石英毛细管)
特点:用于永久性气体(如H₂、O₂、N₂、CO、CH₄)分析。
应用:天然气成分检测、工业气体质量控制。
典型规格:30m×0.32mm(内径无涂层)。
HP-MOLSIV13X(分子筛柱)
特点:分离小分子气体(如CO₂、O₂、N₂O)。
应用:空气质量监测、呼气分析。
典型规格:30m×0.53mm(内径无涂层)。
三、选择步骤与案例
步骤1:明确分析目标
化合物类型:非极性(烷烃)、极性(醇类)、含苯环(药物)等。
分子量范围:小分子(气体)或大分子(聚合物降解产物)。
沸点范围:低沸点(<100℃)或高沸点(>300℃)。
步骤2:匹配固定相极性
规则:遵循“相似相溶”原理,化合物极性与固定相极性越接近,保留越强。
示例:
分析汽油中的C₅–C₁₂烷烃→选择非极性HP-1。
检测葡萄酒中的酯类、醇类风味物质→选择强极性HP-FFAP。
分离农药中的有机磷和拟除虫菊酯类→选择中等极性HP-35。
步骤3:优化柱参数
复杂样品:长柱(60m)+薄膜(0.25μm)提高分离度。
痕量分析:厚膜(0.5–1μm)增加载样量。
快速分析:短柱(15m)+粗内径(0.53mm)缩短运行时间。
步骤4:验证方法条件
温度程序:确保初始温度低于化合物沸点,最终温度低于色谱柱最高耐受温度。
载气流速:根据内径调整(如0.25mm柱常用1–2mL/min氦气)。
进样方式:分流进样(高浓度样品)或不分流进样(痕量样品)。
四、注意事项
避免超温使用:超过最高温度会导致固定相流失,缩短柱寿命。
老化处理:新柱首次使用前需在最高温度下通载气老化2–4小时,去除残留溶剂。
样品预处理:高沸点或强极性样品需衍生化或固相萃取净化,防止污染色谱柱。
方法开发工具:利用安捷伦MethodTranslationCalculator软件,将实验室方法转换为不同色谱柱参数。
五、总结
安捷伦HP系列色谱柱的选择需围绕“固定相极性-柱参数-分析条件”三要素展开。对于通用分析,HP-5是首选;极性化合物分析推荐HP-FFAP或HP-WAX;气体分析则需选择HP-PLOT或MOLSIV系列。通过合理匹配,可实现高效、准确的分离分析,满足食品、环境、制药等多领域的需求。